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上次,我們系統(tǒng)的介紹了AAT Bioquest的鈣離子熒光探針,今天百螢為大家具體介紹一下AAT Bioquest的鈣離子綠色熒光探針與市售的其他綠色探針的對比數(shù)據(jù)。將所有的鈣離子綠色熒光探針放在一起,它們的激發(fā)發(fā)射光線有多大差異?哪款產(chǎn)品的相對亮度更高?細(xì)胞內(nèi)保留時(shí)間更長?細(xì)胞加載時(shí)間更短?AAT Bioquest*亮的綠色鈣離子熒光探針的性能如何?感興趣的朋友一起來看看吧!
綠色鈣離子熒光探針的比較
產(chǎn)品名稱 | Ex/Em(nm) | (信號背景比)S/B | 相對亮度 | 細(xì)胞內(nèi)保留 | 加載時(shí)間 | 其他 |
Fluo-3 | 506/526 | 2 | 50 | 相比*低 | 1 h | 在相同條件下,Calbryte探針的亮度明顯更高 |
Fluo-4 | 494/516 | 4.5 | 100 | 低 | 1 h | |
Fluo-8 | 490/514 | 4.5 | ~200 | 低 | 0.5-1 h | |
Cal-520 | 492/514 | 9.0 | ~150 | 高 | 1-2 h | |
Calbryte-520 | 490/514 | 10.0 | ~350 | 高 | 0.5-1 h |
Calbryte-520的主要功能:
1.異常明亮
2.在細(xì)胞中比Fluo-3和Fluo-4大大提高了信噪比
3.明顯增強(qiáng)的細(xì)胞內(nèi)保留(減少甚至消除了丙磺舒的使用)
4.更快的細(xì)胞加載
圖1.各種綠色鈣離子熒光指示劑對比圖。
Calbryte 520與市售的其他綠色鈣離子指示劑的各類數(shù)據(jù)對比
內(nèi)源性Gq的鈣含量測定---Calbryte 520 vs. Fluo-4
圖2.用熒光顯微鏡ATP誘導(dǎo)CHO-K1細(xì)胞內(nèi)源性P2Y受體反應(yīng)。Calbryte 染料產(chǎn)生更亮的信號,更高的信噪比,并大大增強(qiáng)了細(xì)胞保留能力。
外源Gq的鈣含量測定---Calbryte 520 vs. Fluo-4
Calbryte 520無丙磺舒免洗試劑盒與FLIPR Calcium 4檢測試劑盒數(shù)據(jù)分析
圖3.CHO-K1細(xì)胞中內(nèi)源性P2Y受體對ATP的熒光信號響應(yīng)的比較。 將CHO-K1細(xì)胞以50,000個(gè)細(xì)胞/ 100 μL /孔在黑色96孔板中接種過夜。 使用Screen Quest Calbryte 520無丙磺舒和免洗的鈣測定試劑盒(紅色),F(xiàn)LIPR鈣4測定試劑盒(藍(lán)色)和Fluo-4直接鈣測定試劑盒(綠色)測量鈣通量響應(yīng)。 FlexStation 3添加了ATP(50 μL /孔)以達(dá)到*終指示的濃度。
Calbryte 520和Fluo-4在GPCR(Gi)靶向難標(biāo)記受體中的應(yīng)用數(shù)據(jù)對比
圖4.Rantes在Flexstation中刺激了趨化因子受體5(CCR5)瞬時(shí)轉(zhuǎn)染的CHO細(xì)胞(Cat#38105)中的鈣反應(yīng)(注:上方,深綠色線條為Calbryte 520;下方,淺綠色線條為Fluo-4)
Calbryte 520與GPCR(Gi)目標(biāo)間接cAMP檢測的應(yīng)用
![]() 圖5.嵌合G蛋白(Gqi,Gqo,Gqs,Gqz)或混雜G蛋白(Gα16)可以與Gi,Go或Gs蛋白偶聯(lián)受體結(jié)合,產(chǎn)生外源性細(xì)胞內(nèi)鈣信號。 |
![]() 圖6.使用Calbryte-520 PBX NW試劑盒(#36318)在CHO-Ga16-NOP細(xì)胞(#38100)中測量了傷害感受肽刺激的鈣反應(yīng)。 |
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